Цена доставки диссертации от 500 рублей 

Поиск:

Каталог / ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ НАУКИ / Фармацевтическая химия, фармакогнозия

Исследование цветков бархатцев распростертых (Tagetes patula L.) с целью получения биологически активных веществ

Диссертация

Автор: Подгорная, Жанная Валериевна

Заглавие: Исследование цветков бархатцев распростертых (Tagetes patula L.) с целью получения биологически активных веществ

Справка об оригинале: Подгорная, Жанная Валериевна. Исследование цветков бархатцев распростертых (Tagetes patula L.) с целью получения биологически активных веществ : диссертация ... кандидата фармацевтических наук : 15.00.02 / Подгорная Жанная Валериевна; [Место защиты: ГОУВПО "Пятигорская государственная фармацевтическая академия"] Пятигорск, 2008 145 c. :

Физическое описание: 145 стр.

Выходные данные: Пятигорск, 2008






Содержание:

ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1 Сведения о химическом составе и фармакологически активных компонентах цветков бархатцев распростертых — Tagetes patula L (Обзор литературы)
Выводы по главе 1
ГЛАВА 2 Изучение химического состава цветков бархатцев распростертых (Tagetes patula L)
21 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
211 Обоснование выбора исходного сырья
212 Определение основных групп биологически активных веществ в цветках Tagetes patula
2121 Флавоноиды
2122 Витамины А и Е
2123 Кумарины
2124 Стерины
2125 Аскорбиновая кислота
2126 Аминокислоты
2127 Сапонины
2128 Производные коричной кислоты
2129 Углеводы
213 Витаминный состав цветков Tagetes patula L
214 Аминокислотный состав Tagetes patula L
215 Элементный состав цветков Tagetes patula L
216 Количественное определение флавоноидов в сырье
217 Количественное определение каротиноидов в сырье
218 Количественное определение полисахаридов в сырье
22 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
221 Хроматографическое исследование флавоноидов
222 Определение жирорастворимых витаминов
223 Определение аминокислот
224 Количественное определение флавоноидов в сырье
225 Количественное определение каротиноидов
226 Количественное определение полисахаридов
Выводы по главе 2
ГЛАВА 3 Получение фракций биологически активных соединений из цветков бархатцев распростертых (Tagetes patula L)
31 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
311 Экстракция жидким СОг
312 Экстракция хлороформом
313 Экстракция водным этанолом
32 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
321 Получение СОг-экстракта
322 Получение хлороформного извлечения
323 Получение сухого экстракта
324 Выделение очищенной суммы флавоноидов
Выводы по главе 3
ГЛАВА 4 Исследование химического состава различных фракций, полученных из цветков бархатцев распростертых (Tagetes patula L)
41 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
411 Изучение С02-экстракта
4111 Полифенольный состав
4112 Аминокислотный состав
4113 Витаминный состав
412 Изучение хлороформной фракции
4121 Витаминный состав
413 Изучение химического состава очищенной суммы флавоноидов
414 Изучение химического состава сухого экстракта
4141 Полифенольный состав
4142 Элементный состав
42 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
421 Условия проведения ВЭЖХ анализа
422 Кислотный гидролиз
Выводы по главе 4
ГЛАВА 5 Получение стандартных образцов патулетина и патулитрина и их применение для количественной характеристики фракций из цветков Tagetes pa tula L
51 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
511 Приготовление РСО патулетина и патулитрина для ВЭЖХ анализа
512 ВЭЖХ анализ
513 ВЭЖХ анализ фармакологически активных фракций, полученных из цветков Tagets patula L
514 Разработка метода количественного определения флавоноидов в полученных фракциях и в сырье
52 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
521 Методика выделения патулетина из цветков бархатцев распростертых
522 Методика выделения патулитрина из цветков бархатцев распростертых
523 Условия проведения ВЭЖХ - скрининга
524 Методика приготовления РСО патулетина
525 Методика количественного определения суммы флавоноидов в цветках бархатцев распростертых в пересчете на патулетин
Выводы по главе 5
ГЛАВА 6 Стандартизация цветков бархатцев распростертых (Tagetes patula L)
61 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
611 Макроскопический анализ цветков Tagetes patula L
612 Морфолого-анатомический анализ цветков Tagetes patula L
613 Товароведческие показатели цветков Tagetes patula L
62 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
621 Техника проведения микроскопического анализа
Выводы по главе 6

Введение:
Актуальность проблемы.
Из всех групп природных соединений, применяемых в медицинской практике, особое место занимают флавоноиды, которые опосредовано через ферментные системы регулируют процессы, определяющие, в первую очередь, состояние клеточной мембраны. Широкий спектр действия флавоноидов объясняется их избирательностью по отношению к активным формам кислорода (АФК): при гиперпродукции АФК они проявляют антиоксидантные свойства, а при низком уровне генерации АФК — прооксидантные. В нормализации окислительно-восстановительных процессов важное значение имеет функциональное состояние печени. Наилучшими гепатопротекторными свойствами характеризуются такие лекарственные препараты флавоноидов, как Карсил (Болгария), Легалон (Франция), Силибор (Украина), Фламин (Украина), Конвафлавин (Украина). К сожалению, в настоящее время из лекарственных препаратов, разработанных в бывшем СССР, в Украине, производятся только Фламин и Ликвиритон. Лекарственных препаратов на основе флавоноидов в Российской Федерации производится недостаточно по разным причинам, одной из которых является отсутствие соответствующей сырьевой базы.
Поэтому поиск новых сырьевых источников и разработка отечественных желчегонных и гепатопротекторных средств растительного происхождения является актуальной задачей.
С этой точки зрения большой интерес представляют бархатцы распростертые (Tagetes patula L.), которые характеризуются высоким содержанием каротиноидов, флавоноидов и других биологически активных веществ, но до настоящего времени не нашли применения в официнальной медицине. Известно, что флавоноид из цветков Tagetes patula - патулетин, снижает проницаемость капилляров, обладает гипотензивным и диуретическим действием, проявляет Р-витаминную активность.
На кафедре биологической химии и микробиологии, кандидатом фармацевтических наук Тереховым А.Ю. и доцентом Доркиной Е.Г. была изучена гепатопротекторная, антиоксидантная, противовоспалительная и ранозаживляющая активности отдельных флавоноидных фракций, выделенных нами из цветков бархатцев распростертых. Однако для их внедрения в медицинскую практику необходимы более углубленные исследования химического состава цветков бархатцев, а также изучение влияния основных биологически активных веществ на биохимические процессы.
Поэтому актуальным является химическое и биохимическое обоснование использования цветков бархатцев распростертых в качестве источника для получения суммарных флавоноидных комплексов, оказывающих благоприятное влияние на гепатобилиарную систему. Цель и задачи исследований
Целью настоящей работы является исследование химического состава цветков бархатцев распростертых (Tagetes patula L.) и разработка рациональных путей получения из них индивидуальных соединений, а также суммарных фракций, обладающих желчегонной и гепатопротекторной активностью.
Для реализации поставленной цели мы сочли целесообразным решение следующих задач: изучить качественный и количественный состав основных групп биологически активных соединений цветков Tagetes patula L.; использовать методы избирательной экстракции для получения отдельных фракций и изучить их химический состав; разработать препаративные способы выделения индивидуальных флавоноидов из цветков бархатцев распростертых с целью последующего их использования в качестве стандартных образцов для аналитических целей; обосновать целесообразность использования патулетина как стандартного образца для количественного определения флавоноидов в цветках бархатцев распростертых; определить основные микро-диагностические признаки цветков Tagetes patula L.
Научная новизна
Изучен химический состав основных биологически активных веществ цветков бархатцев распростертых (Tagetes patula L.).
Впервые доказано, что основными флавоноидами в них являются патулетин и патулитрин, а также рутин, робинин, дигидрокверцетин, кверцетин, гиперозид, виценин, лютеолин-7-гликозид, апигенин, витексин.
В цветках бархатцев распростертых впервые установлено наличие двух веществ кумариновой природы - дигидрокумарина и умбеллиферона.
Изучен витаминный и аминокислотный состав цветков бархатцев и показано наличие лейцина, глутаминовой и аспарагиновой кислот, каротиноидов, токоферолов и кислоты аскорбиновой.
Установлено содержание в цветках Tagetes patula L. водорастворимых полисахаридов, пектиновых веществ, гемицеллюлозы А и гемицеллюлозы Б. Впервые изучена сорбционная способность пектинового комплекса бархатцев распростертых.
Элементный состав цветков бархатцев, в основном, представлен макроэлементами.
Изучена зависимость состава извлечений, полученных из цветков бархатцев распростертых, от свойств растворителя и показано, что:
• СОг-экстракт представлен токоферолом, аминокислотами (лизин до 0,3%) и незначительной частью полифенольных соединений;
• в липофильной фракции присутствуют флавонол - патулетин, фитостерины и каротиноиды;
• сухой экстракт, полученный экстракцией спиртом этиловым 70%, характеризуется высоким содержанием полифенольных соединений, а также макро- и микроэлементами;
• очищенный полифенольный комплекс представлен патулетином и его гликозидом — патулитрином.
Учитывая высокое содержание патулетина в сырье и отдельных фракциях нами разработан способ его получения, заключающийся в экстракции цветков бархатцев распростертых (Tagetes patula L.) безводным хлороформом с последующим концентрированием полученного извлечения и отделением самопроизвольно кристаллизующегося целевого продукта в виде светло-желто-зеленых кристаллов фильтрацией и дальнейшей трехкратной кристаллизацией из спирта этилового 70%.
Экспериментально доказано, что для количественного определения суммы флавоноидов в цветках бархатцев и различных фракциях целесообразно применение метода спектрофотометрии, а в качестве стандарта патулетина.
Определены основные микро-диагностические признаки цветков бархатцев распростертых (Tagetes patula L.).
Практическая значимость работы
Разработаны способы получения фармакологически активных фракций: СОг- и сухого экстракта, липофильной фракции, очищенного полифенольного комплекса.
Предложен препаративный способ получения стандартного образца патулетина — доминирующего флавоноида цветков бархатцев распростертых, обладающего выраженной желчегонной и гепатопротекторной активностью.
Разработана методика спектрофотометрического анализа для количественного определения суммы флавоноидов в пересчете на патулетин.
На основании исследований подготовлено информационное письмо для кафедр биологического профиля «Обоснование применения различных фракций из цветков бархатцев распростертых для коррекции экспериментальных гастропатий и гепатозов». Внедрение результатов в практику
Технические условия «Цветки бархатцев распростертых (Tagetes patula L.)» и проект ФСП «Бархатцев цветки «ангро», пачки, фильтр-пакеты», регламентирующие показатели качества сырья внедрены в практику ОАО «Флора Кавказа» КЧР, что подтверждается соответствующими актами внедрения (от 14.03.2007г, от 17.04.2008г).
В настоящее время на кафедре биохимии и микробиологии ПятГФА проводятся углубленные доклинические исследования желчегонной и гепатопротекторной активности патулетина, а также полученных нами суммарных фракций с целью установления механизма действия, что подтверждается соответствующим актом внедрения.
Положения, выдвигаемые на защиту:
• обоснование использования цветков бархатцев распростертых в качестве источника для получения биологически активных веществ;
• результаты химического исследования качественного и количественного состава цветков бархатцев распростертых;
• препаративные методы выделения отдельных фракций и результаты изучения их химического состава;
• предлагаемый способ получения патулетина и патулитрина;
• результаты количественного определения суммы флавоноидов в цветках бархатцев распростертых в пересчете на патулетин;
• диагностические признаки растения бархатцы распростертые (Tagetes patula L.)
Связь задач исследования с проблемами фармацевтических наук
Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательской работы (НИР) ГОУ ВПО Пятигорской ГФА Росздрава, а также в соответствии с соглашением о выполнении НИР между Федеральным агенством по здравоохранению и социальному развитию и ГОУ ВПО Пятигорской ГФА Росздрава (№06/1049).
Апробация работы и публикации
Основные положения диссертационной работы изложены на 58-й, 59-й, 60-й, 61-й, 62-й и 63-й научных конференциях «Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции» (Пятигорск 2005-2008 гг.). По теме диссертации опубликовано 8 работ, в том числе 2 статьи в журналах, рекомендованных ВАК. Получен 1 патент.
Объем и структура диссертации
Диссертационная работа изложена на 145 страницах текста компьютерного набора и состоит из обзора литературы и 5 глав собственных исследований, общих выводов, списка литературы, включающего 167 источников, в том числе 70 иностранных; содержит 28 таблиц, 37 рисунков и приложение.