Цена доставки диссертации от 500 рублей 

Поиск:

Каталог / БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ / Радиобиология

Разработка бентонитового диагностикума для индикации радиоиндуцированных токсических соединений

Диссертация

Автор: Гайнуллин, Руслан Рустамович

Заглавие: Разработка бентонитового диагностикума для индикации радиоиндуцированных токсических соединений

Справка об оригинале: Гайнуллин, Руслан Рустамович. Разработка бентонитового диагностикума для индикации радиоиндуцированных токсических соединений : диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.01 / Гайнуллин Руслан Рустамович; [Место защиты: Федер. центр токсик. и радиац. безопасности животных] - Казань, 2009 - Количество страниц: 147 с. ил. Казань, 2009 147 c. :

Физическое описание: 147 стр.

Выходные данные: Казань, 2009






Содержание:

1 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
2 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
21 Молекулярно-клеточные механизмы лучевого поражения
211 Пути образования радиотоксических веществ и их роль в лучевом поражении организма
22 Природа, роль и выявление радиотоксических веществ в организме животных и объектах ветеринарного надзора
3 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
31 Материалы и методы исследований
311 Материалы исследований
312 Методы исследований
4 РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
41 Получение активированных иммуносорбентов из бентонитов для конструирования противорадиационного диаг- ^ ностикума
42 Разработка технологии изготовления бентонитового диаг- ^ ностикума
43 Индикация радиоиндуцированных антигенов в пробах органов и тканей облученных животных антительным бен- 78 тонитовым диагностикумом
431 Подготовка проб периферической крови, органов и тканей животных для проведения реакции бентонитовой флоку- 79 ляции (РБФ)
432 Выявление радиотоксических веществ в периферической крови облученных животных
44 Индикация радиотоксических веществ в органах и тканях ^ облученных лабораторных животных
45 Применение антительного бентонитового диагностикума (АТБД) для диагностики лучевых поражений е- х живот- 97 ных
5 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ
6 ВЫВОДЫ
7 ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Введение:
1.1 Актуальность проблемы. В связи с сохранением опасности возникновения аварийных ситуаций в атомной промышленности, возникает необходимость быстро решать ряд медицинских и ветеринарных проблем по ранней лабораторной диагностике острых лучевых поражений.
В условиях массовых радиационных поражений, требующих проведения сортировки пострадавших, когда большинство надежных клинических признаков лучевого поражения отсутствуют, а имеющаяся симптоматика весьма неспецифична и полиморфна, что обусловливает бесперспективность использования арсенала традиционных методов для диагностики лучевой патологии (дозиметрических, клинико-гематологических, биохимических, эндокринологических, патофизио-, патоморфологических и т. д.) (Мазурик В.К., 1987), единственным источником количественной информации о наличии и тяжести лучевого поражения становятся биологические показатели (Гембицкий Е.А., Владимиров В.Г., 1978), в частности, биохимические и им-мунохимические (Клемпарская H.H., 1977; Киршин В.А., Низамов Р.Н., Конюхов Г.В., 1999).
На основании работ основоположников отечественной радиационной иммунологии (Петров Р.В., 1962; Киселев П.П., 1960; Троицкий В.Л., 1965; Клемпарская H.H., 1981) и развитых их последователями (Киршин В.А. и др., 1991), стало очевидным, что лучевая болезнь представляет собой вторичный иммунодефицит, сопровождающийся накоплением в организме радиотоксических продуктов оксидативной модификации (анафилотоксины, радиотоксины), обладающие антигенными свойствами и, персистируя в крови, органах и тканях, создают эффект антигенемии (радиотоксинемии) (Петров Р.В.), что является надежной и перспективной основой для разработки методов ранней иммунодиагностики лучевого поражения (Иванов A.A., 1981).
С учетом изложенного в отделе радиобиологии ФГУ «ФЦТРБ -ВНИВИ» были проведены исследования, в результате которых были разработаны иммунофлуоресцентная, иммуноферментная, серологическая (Курбангалеев Я.М., 2000) и аллергическая тест-системы для иммунодиагностики лучевых поражений. В практических условиях наиболее приемлемым и удобным является РИГА - тест с использованием эритроцитарного диагно-стикума. Вместе с тем воспроизводимость РНГА ограничивается высокой чувствительностью эритроцитов к колебанию факторов внешней среды (pH, температура, наличие химических веществ), ведущих к инактивации эритроцитарного препарата (Каральник Б.В., 1976). Для преодоления указанных технологических трудностей рядом исследователей были использованы химические сорбенты, в частности, бентониты, которые в реакции бентонитовой флокуляции (РБФ) значительно превосходят по своей активности известного аналога — РНГА по таким важнейшим параметрам, как чувствительность, стабильность и время исследования. Вместе с тем известно, что используемые в ветеринарии и животноводстве бентониты в качестве сорбентов тяжелых металлов, токсикантов и радионуклидов, весьма вариабельны по минерало - химическому составу, а бентониты Татарстанской зоны относятся к средне- и низкокачественным вариантам бентонитового сырья, что диктует необходимость активации минеральных сорбентов, приводящей к значительному повышению их сорбционной способности как по отношению к токсикантам, так и по отношению к микробным антигенам и антителам (Мераби-швили М.С., 1975; Пручкина З.В. и др., 1982; Бударков В.А., 1999; Лысенко Н.П., 1999; Маяков Е.А. и др., 2002; Тремасов М.Я. и др., 2004; Ежкова A.M., 2005; Антипов В.А. и др., 2007; Шкаева H.A., 2008; Wallace R., 1970)
Учитывая, что поиск методов и средств повышения эффективности иммунологических тест-систем для индикации радиотоксических веществ в организме животных и животноводческой продукции, а также уточнение замены биологического сырья на природные (химические) иммуносорбенты при изготовлении стабильных диагностикумов, представляет одну из актуальных задач иммунохимии, нами были предприняты настоящие исследования.
1.2. Цель и задачи. Целью настоящих исследований являлась разработка противорадиационного бентонитового диагностикума для индикации радиоиндуцированных токсических продуктов в организме животных.
Исходя из поставленной цели, на разрешение были поставлены следующие задачи:
1. Отработать оптимальные условия активации бентонитового сырья для использования его в качестве иммуносорбента в реакции бентонитовой флокуляции (РБФ).
2. Получить высокоактивные и специфические антигены, противолучевые гипериммунные сыворотки и иммуноглобулины для конструирования антительного бентонитового диагностикума (АТБД).
3. Сконструировать бентонитовый диагностикум и испытать его эффективность на лабораторных и с.-х. животных.
1.3. Научная новизна. Впервые разработана технология изготовления высокочувствительного и специфичного противолучевого АТБД для специфической индикации радиоиндуцированных антигенов в организме облученных животных в реакции бентонитовой флокуляции.
С учетом возможности применения полученного АТБД при серологической диагностике лучевых поражений животных, определены диагностические критерии лучевой болезни, предусматривающие обнаружение радиоиндуцированных антигенов в исследуемых пробах (сыворотке крови, плазме, лейкоцитах, внутренних органах) в титрах - 1:8 — 1:512. Показано, что наличие изучаемого антигена в исследуемых пробах в титрах, превышающих диагностический на 3 шага разведения является неблагоприятным прогностическим признаком, ведущим к радиационной гибели животных. Научная новизна подтверждена патентом РФ №  232476 .
1.4. Теоретическая и практическая ценность работы. На основе сравнительного изучения эффективности различных иммуносорбентов предложен диагностикум нового поколения - антительный бентонитовый диагностикум (АТБД) для обнаружения радиомодифицированных оксидативных макромолекул (РМОМ) в организме животных. По результатам исследований будут разработаны методические рекомендации по получению и применению бентонитового диагностикума для индикации радиотоксических веществ (РТВ) в сыворотке крови, органах и тканях облученных животных.
1.5. Основные положения, выносимые на защиту.
1. Оптимальные параметры улучшения сорбционных свойств низкосортного бентонитового сырья.
2. Условия получения органомонтмориллонитовых комплексов на основе бентонита и специфических иммуносорбентов.
3. Применение бентонитового диагностикума в реакции бентонитовой флокуляции для индикации радиомодифицированных оксидативных молекул в организме.
1.6. Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены, обсуждены и одобрены на ежегодных сессиях Ученого совета ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» по рассмотрению отчетов о НИР (Казань, 2005-2008 гг.), научно-практической конференции молодых ученых и специалистов ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» (Казань, 2007-2008), Всероссийской научно-практической конференции ФГОУ ВПО «КГАВМ им. Н.Э. Баумана» (Казань, 2007), Российской научной конференции Военно-медицинской академии (Санкт-Петербург, 2008).
1.7. Публикация результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано научных работ, в том числе 2 статьи в рекомендованных ВАК РФ изданиях.
1.8. Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 144 страницах компьютерной верстки, состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов, результатов собственных исследований и их обсуждения, выводов, предложений производству, приложений. Работа иллюстрирована 18 таблицами. Список использованной литературы включает 222 наименований, в том числе 42 - зарубежных авторов.