Цена доставки диссертации от 500 рублей 

Поиск:

Каталог / МЕДИЦИНСКИЕ НАУКИ / Фармакология, клиническая фармакология

Влияние афобазола на тератогенный и генотоксический эффект циклофосфамида в эмбриональных тканях и плаценте крыс

Диссертация

Автор: Шредер, Ольга Васильевна

Заглавие: Влияние афобазола на тератогенный и генотоксический эффект циклофосфамида в эмбриональных тканях и плаценте крыс

Справка об оригинале: Шредер, Ольга Васильевна. Влияние афобазола на тератогенный и генотоксический эффект циклофосфамида в эмбриональных тканях и плаценте крыс : диссертация ... кандидата биологических наук : 14.00.25 / Шредер Ольга Васильевна; [Место защиты: Науч.-исслед. ин-т фармакологии РАМН] Москва, 2009 169 c. : 61 09-3/317

Физическое описание: 169 стр.

Выходные данные: Москва, 2009






Содержание:

ВВЕДЕНИЕ
1 ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР
11 Современные представления о тератогенезе
111 Основные закономерности тератогенеза
112 Механизмы тератогенеза
1121 Генотоксические механизмы тератогенеза
12 Современные принципы исследования тератогенеза
121 Генотоксикологические подходы к исследованию тератогенеза
122 Тератогенный эффект циклофосфамида
13 Профилактика тератогенеза
131 Антимутагенная профилактика тератогенеза
1311 Антимутагенные свойства афобазола
2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
21 Препараты и режимы введения
22 Экспериментальные животные
23 Методы исследования антитератогенной активности на модельных животных
231 Метод Вильсона
232 Метод П Петерса
24 Метод «ДНК-комет»
3 РЕЗУЛЬТАТЫ
31 Модель тератогенного действия циклофосфамида
32 Влияние афобазола на эмбриотоксические эффекты циклофосфамида
33 Оценка влияния афобазола на тератогенез индуцированный циклофосфамидом
331 Влияние афобазола при однократном введении на тератогенные эффекты циклофосфамида
3311 Макроскопическое исследование плодов
3312 Микроанатомическое исследование внутренних органов эмбрионов
3313 Оценка состояния костной системы
332 Влияние афобазола при трехдневном введении па тератогенные эффекты циклофосфамида
332 1 Макроскопическое исследование плодов
332 2 Микроанатомическое исследование внутренних органов эмбрионов48 332 3 Оценка состояния костной системы
34 Оценка влияния афобазола на генотоксические эффекты циклофосфамида
341 Влияние афобазола на ДНК-повреждения и апоптотический эффект циклофосфамида в эмбриональной и плацентарной тканях крыс при 20 часовой экспозиции
3411 Плацента
3412 Эмбрион
342 Влияние афобазола на ДНК-повреждения и апоптотический эффект циклофосфамида в эмбриональной и плацентарной ткани крыс при 24 часовой экспозиции
3421 Плацента
3422 Эмбрион
35 Количественная оценка ДНК-повреждений в эмбриональной и плацентарной тканях
351 Распределение частот клеток с ДНК различной степени фрагментации в группе животных позитивного контроля
3511 20 часовая экспозиция
3512 24 часовая экспозиция
352 Распределение частот клеток с ДНК различной степени фрагментации в группе животных негативного контроля
3521 20 часовая экспозиция
3522 24 часовая экспозиция
353 Сравнительная оценка распределения частот клеток с ДНК различной степени фрагментации в экспериментальных группах животных
3531 20 часовая экспозиция
3532 24 часовая экспозиция
36 Оценка корреляционной связи между антигенотоксическим и антитератогенным эффектами афобазола
361 Анализ взаимосвязи между степенью поврежденности ДНК в клетках плацент и эмбрионов и влиянием афобазола на эти негативные эффекты
3611 20 часовая экспозиция
3612 24 часовая экспозиция
362 Анализ зависимости выхода поврежденных ДНК в клетках эмбрионов от количества нормальных, поврежденных и апоптотических клеток в плаценте
3621 20 часовая экспозиция
3622 24 часовая экспозиция
363 Анализ зависимости появления пороков развития у эмбрионов от количества нормальных, поврежденных и апоптотических клеток в ткани плацент и эмбрионов
3631 20 часовая экспозиция
36311 Плацента
36312 Эмбрион
3632 24 часовая экспозиция
36321 Плацента
36322 Эмбрион
4 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
5 ВЫВОДЫ

Введение:
Актуальность исследования. Тератогенные воздействия имеют серьезные медицинские последствия и являются причиной невынашивания беременности (до 46,6 %), младенческой смертности и инвалидизации населения, которая среди детей и подростков в России составляет 190-210 случаев на 10 ООО человек [15, 85].
Спектр тератогенов весьма обширен - это некоторые лекарства, косметические компоненты, экотоксиканты, производственные и бытовые вредности. В наиболее известном каталоге, известном как «список Шепарда» [215], указывается на возможную опасность со стороны около 1200 распространенных потенциальных тератогенных факторов. Прямо доказанную тератогенную опасность для человека представляет около 50 факторов различной природы [141].
Широкая распространенность тератогенов определяет неизбежность их контакта с человеком и необходимость внедрения мер по профилактике тератогенеза. Поиск фармакологических средств защиты от тератогенных воздействий отвечает поставленной государственной задаче по охране и сохранению репродуктивного здоровья населения России (Постановление общего собрания РАМН, 2008). Ее решение требует изучения механизмов тератогенеза и, на этой основе, возможных путей предупреждения и коррекции тератогенных воздействий.
Особое внимание в области изучения тератогенеза привлекают генотоксиканты - вещества, вызывающие повреждения ДНК и мутагенез [10]. Роль мутагенеза в становлении тератогенных повреждений широко обсуждается, в настоящий момент имеются сведения, указывающие на тесную сопряженность тератогенных и цито-генетических эффектов ряда соединений [167]. В свою очередь, роль повреждений ДНК в тератогенезе практически не исследована из-за методических трудностей. Только с появлением метода «ДНК-комет», в модификациях, позволяющих оценивать ДНК поврежденность клеток различных тканей in vivo [44], открылись новые перспективы исследования генотоксических механизмов тератогенеза.
Возможная роль мутагенных поражений и повреждений ДНК в тератогенезе позволили предположить, что в качестве средств профилактики тератогенеза могут применяться вещества, обладающие антимутагенной активностью. В частности, лекарства, антимутагенная активность которых была установлена и исследована в НИИ фармакологии им. В.В. Закусова НИИ фармакологии РАМН [43].
В этой связи внимание привлекает новый отечественный анксиолитик афобазол, разработанный в ГУ НИИ фармакологии РАМН им. В.В. Закусова под руководством академика РАМН С.Б. Середенина и продемонстрировавший в экспериментах на млекопитающих выраженные антимутагенные свойства [48, 84].
Цель исследования. Целью настоящей работы явилось комплексное исследование влияния афобазола на тератогенез и ДНК-повреждения в эмбриональных тканях и плаценте, индуцированные известным мутагеном и тератогеном циклофос-фамидом.
Основные задачи исследования.
Для достижения цели были поставлены следующие задачи:
1. Адаптировать циклофосфамидную модель тератогенного действия к условию получения максимального тератогенного эффекта без увеличения спонтанной гибели эмбрионов в период активного органогенеза.
2. Оценить влияние афобазола в разных дозах при однократном введении на 14 день беременности и трехдневном введении на 13-15 днях беременности, на тератогенез, индуцированный циклофосфамидом.
3. Исследовать временные и дозовые зависимости влияния афобазола на индуцированные циклофосфамидом ДНК-повреждения и апоптоз в эмбриональных тканях и плаценте.
4. Провести анализ взаимосвязи между повреждениями ДНК в эмбриональных тканях и плаценте с возникновением пороков развития эмбрионов.
Научная новизна. Впервые установлено, что анксиолитик афобазол, обладающий антимутагенными свойствами, при различных режимах введения, дозозависи-мо снижает тератогенный эффект циклофосфамида. В частности, под действием афобазола показано уменьшение количества эмбрионов с грубыми аномалиями: менингоэнцефалоцеле, краниошизис, микрогнатия, гипогнатия, протрузия языка, омфалоцеле, тератома, повреждения передних и задних конечностей, расщелина позвоночника (Spina bifida), сколиоз, гидроцефалия, ураношизис. Антигенотокси-ческая активность афобазола впервые выявлена в эмбриональных тканях и плаценте, что дополняет ранее установленные данные об антимутагенных свойствах этого препарата в клетках соматических тканей. Сформулирована рабочая гипотеза о роли предмутационных поражений ДНК в эмбриональных тканях и плаценте в формировании тератогенных эффектов. Установлено, что увеличение и разнообразие аномалий развития эмбрионов коррелирует с уровнями ДНК-повреждения и апоп-тоза не только в эмбриональных тканях, но также в клетках плаценты.
Научно-практическая значимость. Совокупность полученных данных создает научно-обоснованную базу для поиска средств фармакологической профилактики тератогенеза и определяет актуальность изысканий антитератогенов среди соединений с антимутагенными свойствами, расширяет представления о методических возможностях метода «ДНК-комет», впервые апробированного при определении целостности ДНК в эмбриональных и плацентарной тканях.
Практически важным является выявленное совпадение доз, в которых афобазол -проявляет основной анксиолитический эффект, антимутагенное и антитератогенное действие, что открывает перспективы расширения показаний его клинического применения.
1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР